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毛細管電泳儀使用時需要注意這幾點

更新時間:2022-03-03      點擊次數(shù):2037
  毛細管電泳儀是根據(jù)在電解質(zhì)溶液中,帶電粒子在高壓電場作用下,以不同的速度定向遷移的現(xiàn)象來達到組分分離的目的。各組分分離后通過檢測器進行檢測,并根據(jù)各組分的遷移時間和響應值進行定性、定量分析。電泳的支持物是彈性石英毛細管。儀器主要由高壓電源、進樣器、毛細管柱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等幾部分構成。
  由于受毛細管內(nèi)總體積的制約,對于濃度很稀的樣品,毛細管電泳儀不能象HPLC那樣可加大進樣量來提高檢測靈敏度,但可采取一些措施來改善。
  1.當樣品緩沖液的電導明顯低于(100倍以上)電泳緩沖液時,毛細管兩端加上電壓后可在樣品區(qū)帶前后形成一個更大的電場,使樣品溶液中的分子遷移的更快。當這些分子到達電泳緩沖液邊界時,由于電場減弱,遷移速度減慢,使樣品區(qū)帶由寬變窄,濃度提高,而達到濃縮的目的。
  2.當樣品緩沖液和電極緩沖液的電導一樣,而樣品濃度較稀,不適合再作稀釋時,可在進樣前先吸入一些水,也能達到濃縮的目的。無論采取何種進樣方式,上述方法都可使樣品堆積濃縮。但由于在堆積區(qū)帶電勢陡降,會導致此區(qū)帶溫度升高。
  3.毛細管插入樣品溶液后,應立即開始進樣操作,完成后迅速移至緩沖液中開始電泳。否則會產(chǎn)生毛細作用和虹吸現(xiàn)象,引起誤差并使譜帶展寬。
  4.電極不要和毛細管接觸,樣品貯器和緩沖液貯器液面的高度應保持平衡。
  5.使系統(tǒng)盡可能保持恒溫。因溫度直接影響粘度,而影響進樣量的恒定。
  6.樣品溶液中的溶劑必須與緩沖液互溶,前者的離子強度應低于后者。
  7.防止樣品溶液和緩沖液蒸發(fā)、損耗。

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